Авг
08
Опубликовано: 08 Авг 2010
Рубрика: Болезни пчел | Автор: admin

При наличии спор ноземы в поле зрения видны овальные, преломляющие свет тела. Просмотру подлежит 20 полей зрения микроскопа. Оценку степени поражения проводят по 3- или 4-балльной системе: ( + ) — единичные споры ноземы (до 10 спор) в поле зрения микроскопа; ( + + ) — 10—100 несоприкасающихся спор; ( + + + ) —многочисленные соприкасающиеся споры (100—1000 спор); ( + + + + ) —свыше 1000 спор ноземы.

Для определения количества спор используют также подсчет их в гемоцитометре (камера Горяева) в 5 больших или 80 маленьких квадратах. Зная объем камеры, общий объем пробы и число пчел, вычисляют количество спор на одну пчелу.

Групповой метод исследования не позволяет установить интенсивность и экстенсивность поражения пчел в пробе — важных показателей для прогноза и динамики заболевания. При латентном течении болезни диагноз этим методом не всегда возможен. В этих случаях индивидуальное исследование пчел в пробе дает более достоверный результат.

Для ускорения процесса гомогенизации брюшек пчел используют многокамерные гомогенизаторы и многоштыревые пружинные капельницы. Оценка поражения отдельных насекомых в пробе проводится аналогичным путем и позволяет выявить число пораженных особей и количество спор паразита на пчелу. Наличие единичных спор в небольшом числе особей может свидетельствовать о начале заболевания, загрязненности гнезда инактивиро-ванными спорами или взятии материала из семей, ранее переболевших нозематозом. Выделение спор из всех или большинства пчел с различным количеством паразитов в отдельных особях позволяет предполагать разгар заболевания. Обнаружение большого количества спор у большинства особей пробы указывает на неблагоприятный исход болезни, отсутствие пополнения семьи молодыми пчелами (прекращение откладки яиц маткой или ее гибели).

При слабой пораженности пчел в пробе можно использовать метод концентрации спор. Для этого из брюшек или кишечника готовят суспензию, которую фильтруют через 1—2 слоя марли. Фильтрат центрифугируют на радиальной центрифуге при 1500 мин"1 в течение 15 мин. Исследуют средний слой осадка, представленный спорами ноземы. Возможно использование других методик концентрации и очистки спор (метод триангуляции, основанный на восьмикратном последовательном центрифугировании суспензии спор; метод получения чистых спор при пропускании гомогената из брюшек через ряд сит с разными

диаметрами и т. д.). Эти методы позволяют уточнить диагноз при массовых исследованиях на наличие спор ноземы.

В научно-исследовательских учреждениях при работе с микроспоридиями, в основном для получения специфических сывороток к микроспоридиям пчел и постановки серологических реакций, требуется более тщательная очистка и концентрация спор. Для этой цели используют чередование метода триангуляции с очисткой спор в градиенте плотности сахарозы (50—60%-ной концентрации) при 75 000 g в течение 30 мин (3. Э. Родионова, 1986).