Авг
08
Опубликовано: 08 Авг 2010
Рубрика: Болезни пчел | Автор: admin

Кокки удлиненной (ланцетовидной) формы размером 0,7—1,5 мкм, одиночные, в цепочках различной длины

или в скоплениях (рис. 1); клеткам микроба двойственен полиморфизм, могут присутствовать палочковидные формы. Грамположительны, спор не образуют, кислотоустойчивы, неподвижны. Анаэробы до микроаэрофилов; существенное требование для роста, особенно при первичном выделении,— анаэробные условия с содержанием 5—10 % углекислого газа (по объему). Оптимальная температура культивирования 35° С, отмечается рост при температуре 20—45°С. Оптимум рН среды 6,5—6,6. Требует соотношения в среде натрия и калия меньше единицы.

Mel. pluton не растет на обычных бактериологических питательных средах, так как проявляет высокую требовательность к культуральным условиям, главные. из которых — наличие глюкозы или фруктозы (около 1 % по массе), низкое соотношение натрия и калия, источник органических соединений азота и дополнительных факторов роста. Для культивирования разработана специальная питательная среда следующего состава: дрожжевой экстракт — 1 г; глюкоза — 1 г; КН2РО4— 1,35 г; растворимый крахмал — 1 г; 100 мл дистиллированной воды; рН 6,6 по КОН; добавляют 2 г агара и автоклавируют при 116°С 20 мин (Bailey, 1957). Возможны модификации среды путем замены дрожжевого экстракта пептоном («Bacto», «Oxoid»), при условии добавления цистеина или цистина (0,02—0,2 %). Растворимый крахмал способствует адсорбции ингибиторов, что особенно важно при выделении Mel. pluton на агаризованных средах.

В нашей стране для выделения и культивирования Mel. pluton применяется видоизмененная В. Т. Череповым среда Бейли, которую готовят следующим образом: 300 г очищенных клубней картофеля (без глазков) варят 15— 20 мин в 1 л водопроводной воды, не допуская разварива-

ния клубней. Отвар фильтруют через ватно-марлевый фильтр и доводят до первоначального объема. В отвар добавляют 20 г агара и 3 г пептона, нагревают и тщательно перемешивают. Смесь стерилизуют в автоклаве при 1 атм в течение 20 мин, охлаждают до 45—50°С, добавляют 3% экстракта пекарских дрожжей и 3% глюкозы, доводят рН до 6,8, разливают в пробирки и стерилизуют при 0,5 атм 3 дня подряд по 15 мин.

На агаризованных средах через 2—4 дня Mel. pluton образует мелкие (около 1 мм в диаметре) белые плотные или зернистые непрозрачные колонии с ровным краем. Некоторые штаммы, главным образом изоляты от Apis cerana, образуют относительно прозрачные колонии более крупных размеров кольцевидной формы с четким центром и зернистор периферической частью. На жидкой среде растут в виде хлопьев, на дне пробирки выпадает белый осадок.